免疫沉淀磁珠  
1.免疫沉淀磁珠在洗脫了抗原之后，如何回收處理磁珠？
答：免疫沉淀磁珠為一次性使用，不建議回收磁珠，否則可能影響下一次測(cè)試。

2.IP 試劑盒是否適合做抗體純化？
答：不建議將 IP 試劑盒用于抗體純化。

3.純化得到的抗體體積較少，用透析除鹽的方法可能損失較大，還有沒有其他方法除鹽？
答：純化得到的抗體，還可以用超濾的方法除鹽。

4.一次反應(yīng)可以結(jié)合多少抗體？
答：一次反應(yīng)為100μL磁珠懸液，結(jié)合抗體的量為30μg。

鏈霉親和素磁珠
1.保存溶液是什么？
答：1×PBS，含0.1%（v/v）Tween -20，0.1%（w/v）NaN3。

2.保質(zhì)期多久？
答：保質(zhì)期為1年。

3.抗體結(jié)合量多少？
答：抗體結(jié)合量>20μg/mg beads。

4.鏈霉親和素磁珠的結(jié)合能力？
答：游離生物素結(jié)合量為1000 pmol/mg beads
生物素化單鏈寡核苷酸結(jié)合量為400 pmol/mg beads
生物素化IgG結(jié)合量為20μg/mg beads。

5.封閉條件？
答：含1%-5% BSA的 PBST緩沖液，室溫反應(yīng)30min-1h。

6.能不能用于細(xì)胞分選？
答：有文獻(xiàn)報(bào)道，可以用于細(xì)胞陰選 。細(xì)胞陽(yáng)選請(qǐng)慎重考慮，暫無支撐數(shù)據(jù)。

7.如何將生物素標(biāo)記的生物配體與SA磁珠分離？
答：方法一：0.1% SDA，煮沸5min;
方法二： pH=8.2，含95%甲酰胺的10mM EDTA中，65℃ 5min或者90℃ 2min。 脫落率95%。

NHS 磁珠
1.Mag NHS的抗體偶聯(lián)量多大？
答：偶聯(lián)量>30μg IgG/mg磁珠
       偶聯(lián)量為35-71μg  protein A/mg磁珠。

2.抗體中含0.02% NaN3是否需要去除？如何去除？
答：NaN3雖然會(huì)對(duì)抗體跟磁珠的結(jié)合形成競(jìng)爭(zhēng)。一般情況下，小于0.05%NaN3的可以忽略不計(jì)。如果NaN3含量多，可以采用透析的方法去除。

3.該磁珠用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，空白背景值很高，具體原因？
答：不同體系磁珠的使用效果不同，對(duì)于背景值高的體系，需要采用不同的封閉體系。

4.確定合適的Coupling Buffer的實(shí)驗(yàn)方法和判斷方法有哪些？
答：為方便實(shí)驗(yàn)操作，可以采用原蛋白保存溶液，必須不含有氨基小分子。一般采用PBS或者M(jìn)ES。

5.對(duì)于免疫沉淀實(shí)驗(yàn)，背景高怎么解決？
答：采用1～5%BSA封閉。

6.Mag NHS開封使用后，一周后使用，發(fā)現(xiàn)偶聯(lián)效果明顯降低，是否是因?yàn)镹HS基團(tuán)降解？
答：該磁珠只要密封保存4℃冰箱即可，不會(huì)存在明顯的基團(tuán)水解情況。偶聯(lián)效果降低主要跟實(shí)驗(yàn)操作過程相關(guān)。建議重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

7.確定合適的偶聯(lián)蛋白濃度的實(shí)驗(yàn)方法和判斷方法有哪些？
答：Mag NHS磁珠的IgG偶聯(lián)量為30μg/mg磁珠。取1mg磁珠作為反應(yīng)量時(shí)，加入IgG的量為45μg-60μg左右。并且配制IgG溶液的體積越少越好，但要保證磁珠能夠分散。

8.Mag NHS和Magrose NHS磁珠怎么選擇？
答：Mag NHS磁珠靈敏度高，用于檢測(cè)、免疫沉淀實(shí)驗(yàn)。Magrose NHS磁珠載量高，用于純化方向。