美天旎磁珠分選

一、磁珠分類

1.什么是MACS磁珠？

MACS磁珠指與高度特異性的單克隆抗體相偶聯(lián)的超順磁化微粒，可用于目的細(xì)胞的磁性標(biāo)記。

2.MACS磁珠分類

(1)直標(biāo)磁珠：微珠通過偶聯(lián)的抗體，直接磁性標(biāo)記細(xì)胞。

(2)間標(biāo)磁珠：如果細(xì)胞群體沒有直接標(biāo)記的磁珠，可以利用間接標(biāo)記使得非偶聯(lián)的、生物素化的或者熒光素偶聯(lián)的一抗標(biāo)記細(xì)胞；使用IGG、抗生物素鏈酶親和素或者抗熒光素的分別進(jìn)行磁性標(biāo)記。

(3)多選磁珠：微珠通過偶聯(lián)的抗體，直接磁性標(biāo)記細(xì)胞，通過酶催化反應(yīng)，從抗體上解離。

(4)全血磁珠：從外周血中直接分選細(xì)胞，無需裂解紅細(xì)胞，無需密度梯度離心，直接上柱分選。對(duì)應(yīng)產(chǎn)品指標(biāo)：CD3、CD4、CD8、CD14、CD15、CD19、CD33、CD45、CD56、CD66b（中性粒&嗜酸性）、CD138和anti-ROR1（慢性淋巴細(xì)胞白血病）。

3.磁珠特點(diǎn)

(1)美天旎磁珠為nm級(jí)別磁珠，是目前最小的一款磁珠只有50nm，無需解離，可以直接進(jìn)行流式檢測(cè)或培養(yǎng)臨床細(xì)胞治療中唯一可以使用的磁珠；

(2)磁性標(biāo)記20%-30%的結(jié)合位點(diǎn)，不影響細(xì)胞的熒光抗體標(biāo)記；

(3)磁珠主要成分是葡聚糖和氧化鐵，對(duì)細(xì)胞沒有毒性，不會(huì)影響細(xì)胞特性；美天旎磁珠可以生物降解；

(4)目前可提供凍干粉包裝的磁珠，凍干粉包裝有效期一般為2年。

二、如何選擇合適的分選器

MACS磁珠分選所用到的主要組分有：MACS磁珠、MACS分選柱和MACS分選器。為了方便客戶直接買齊磁珠分選的耗材和設(shè)備，Starting Kit起始套裝包括：分選器1個(gè)，分選架1個(gè)，分選柱1盒（25個(gè)），磁珠1盒。

1.手動(dòng)分選產(chǎn)品

(1)MiniMACS Starting Kit （送磁珠）

(2)MidiMACS Starting Kit （送磁珠）  

(3)Mini & MidiMACS Starting Kit（送磁珠） 

(4)OctoMACS Starting Kit （送磁珠）

(5)QuadroMACS Starting Kit （送磁珠） 

(6)MACSxpress Separator

三、如何選擇合適的分選柱

MACS分選柱家族

1.陽性分選

磁性標(biāo)記的細(xì)胞為目的細(xì)胞，簡單、快速。分選完后磁珠無需解離，可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

①分選多少細(xì)胞

②分選常見細(xì)胞還是稀有細(xì)胞

為了在分選稀有細(xì)胞（表達(dá)頻率＜5%）過程中得到更高的純度，應(yīng)該使用兩個(gè)分選柱：用一根分選柱做第一次分選；陽性成分再過一次新的分選柱。陽性分選中連續(xù)使用2個(gè)分選柱，可以獲得更高的分選純度。

③是否分選大體積的細(xì)胞

如果要分選的目的細(xì)胞是體積較大的特殊細(xì)胞，如原生動(dòng)物細(xì)胞、人皮膚郎罕式細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、心肌細(xì)胞等，那推薦您使用Large cell column。因?yàn)榇蠹?xì)胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細(xì)胞順利通過。

2.陰性分選

分選“未接觸細(xì)胞”，磁珠標(biāo)記在非目的細(xì)胞上。

①使用MACS Cell Isolation kits 或 MACS MicroBeads？

②抗原表達(dá)是強(qiáng)還是弱？

③需要更高的純度還是回收率？

④分選多少細(xì)胞？

3.多重分選策略——獲得多參數(shù)細(xì)胞

先進(jìn)行去除分選（第一步分選），然后進(jìn)行陽性分選（第二步分選）。多選微珠再陽選。

4.分選柱和分選器的搭配